L’édifice commandé par le pape Alexandre VII Chigi, autrefois connu sous le nom d’Ospedaletto, représente l’agrandissement du Santo Spirito au XVIIe siècle. Il a été construit perpendiculairement à l’hôpital du XVe siècle, les Corsie Sistine, et donne sur la rive droite du Tibre. On accède à la Salle Alessandrina par un escalier situé devant le grand portail en retrait. Il s’agit d’une vaste salle rectangulaire dont le plafond conserve son caisson d’origine en bois. Au fond de la salle, un escalier monumental orné de bustes en plâtre représentant des médecins célèbres se développe symétriquement en un double escalier, permettant l’accès à l’étage supérieur. La Salle Alessandrina accueille une exposition de nombreuses œuvres graphiques d’Antonio Serantoni du XIXe siècle, des planches anatomiques colorées à la main, ainsi que plusieurs peintures sur bois ayant appartenu au célèbre médecin Guglielmo Riva.